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钟医这么做,自然是担心陈浩然听不懂。
不过嘛,钟医看了那么一两分钟,还是么有看出陈浩然到底是听懂了,还是没有听懂,只有作罢了。
于是他继续说道。
“至于Westernblot法检测。
我们将大鼠腹主动脉NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白的表达情况将大鼠腹主动脉称质量后,加入RIPA蛋白裂解液匀浆,12克,4摄氏度,离心15分钟,取上清,测定蛋白浓度后加蛋白上样缓冲液,100摄氏度加热变性,负80摄氏度备用。
根据NLRP3、ASC、Caspase-1的分子量,选择不同浓度制胶,电泳,PVDF转膜,用一抗封闭缓冲液百分之五的BSA室温摇床封闭1小时,分别置入加有NLRP3、ASC、Caspase-1抗体稀释液的抗体盒中,4摄氏度孵育过夜。
等到第二天,再漂洗3次,加入二抗溶液(羊抗兔二抗室温孵育1小时。TBST漂洗3次,ECL显色曝光。
以β-actin为内参进行半定量计算用于统计分析。
然后再用统计学分析采用SPSS22.0统计软件进行数据分析,计量资料以±s表示。
采用单因素方差分析比较多组间差异性,P0.05为差异具有统计学意义。”
钟医介绍道。
说完,钟医又往陈浩然脸上看去,真的是先从陈浩然的脸上看出他到底是听懂了还是没有听懂。
不过嘛,他到底真的没有看出什么,别人的目光却全部都集中在了钟医脸上。
“看我干什么?继续说,你们实验的结果是什么?”陈浩然瞪了一眼钟医说道。
“哦。”钟医略微失望地应了一声。
“实验结果更是显而易见。
其一,黄芪甲苷对糖尿病动脉粥样硬化大鼠体质量、空腹血糖的影响与对照组相比,模型组、阳性药组、黄芪甲苷低剂量和高剂量组大鼠体质量增加无显著差异。
与对照组相比,模型组大鼠空腹血糖显著升高。
与模型组相比,阳性药组及黄芪甲苷组大鼠血糖均显著降低。
这能说明,黄芪甲苷对糖尿病动脉粥样硬化大鼠体质量、空腹血糖的影响。
其二,黄芪甲苷对糖尿病动脉粥样硬化大鼠血清TC、TG、小时DL及LDL含量的影响与对照组相比,模型组大鼠血清TC、TG、LDL水平显著升高,小时DL水平显著降低。
与模型组相比,阳性药组及黄芪甲苷组大鼠血清TC、TG、LDL水平显著降低,小时DL水平显著升高。
黄芪甲苷对糖尿病动脉粥样硬化大鼠血清TC、TG、小时DL及LDL含量的影响很大。
其三,黄芪甲苷对糖尿病动脉粥样硬化大鼠腹主动脉病理形态的影响对照组大鼠未见血栓形成斑块,各主动脉内膜光滑完整。
而模型组大鼠出现外膜出血,大量泡沫葛凡,黄芪甲苷通过NLPR3炎性小体调节糖尿病动脉粥样硬化早期大鼠血脂及炎症因子的研究细胞聚集,导致内膜增厚,平滑肌细胞增生,形成动脉粥样硬化斑块。
阳性药及黄芪甲苷组大鼠主动脉外观正常。
黄芪甲苷对糖尿病动脉粥样硬化大鼠腹主动脉病理形态的影响。
其四,黄芪甲苷对糖尿病动脉粥样硬化大鼠腹主动脉IL-6、IL-10、CRP、TNF-α含量的影响与对照组相比,模型组大鼠动脉组织中IL-6、CRP、TNF-α水平显著升高,IL-10水平显著降低。
与模型组相比,阳性药组及黄芪甲苷组大鼠IL-6、CRP、TNF-α水平均显著降低,IL-10水平显著升高。
这能说明,黄芪甲苷对糖尿病动脉粥样硬化大鼠腹主动脉IL-6、IL-10、CRP、TNF-α含量是有绝对影响的。”
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